CHAPS è un composto organico con formula molecolare C ₃₂ H ₅₈ N ₂ O ₇ S e peso molecolare 614.877.CHAPS è una sorta di detergente zwitterionico, ampiamente utilizzato nel processo di purificazione delle proteine. CHAPS può anche essere utilizzato nella ricerca biochimica per denaturare e dividere le cellule, estrarre RNA e DNA; Inoltre, CHAPS può anche essere utilizzato per la preparazione di una soluzione tampone. Il brevetto CN106478786A descrive un metodo per estrarre una proteina intracellulare efficace del batterio di desolforazione. CHAPS è usato come tensioattivo anfotero nel brevetto. Le fasi specifiche dello schema sono le seguenti:

(1)  Coltura di attivazione dei batteri di desolforazione, coltura di fermentazione liquida, prendere il brodo di fermentazione, centrifugare, rimuovere il supernatante e raccogliere il sedimento inferiore;

(2)  Prendere il precipitato negli strati medio e inferiore del passaggio (1), aggiungere 1~2 ml/g di soluzione di cracking (il liquido di cracking è la soluzione acquosa di urea, tensioattivo anfotero e agente protettivo riducente, in cui il tensioattivo anfotero è CHAPS), agitarlo magneticamente a 0~4 ℃ e metterlo in - 18~- 22 ℃ per 8~10 ore.

(3)  La sostanza congelata nella fase (2) viene rotta ad ultrasuoni a 0~4 ℃ , quindi posta nuovamente a -18~-22 ℃ per 8~10 ore;

(4)  La sostanza congelata nella fase (2) viene rotta ad ultrasuoni a 0~4 ℃ , quindi posta nuovamente a -18~-22 ℃ per 8~10 ore;

(5)  Prelevare la soluzione proteica supernatante ottenuta mediante centrifugazione nella fase (4), aggiungere la soluzione mista organica, miscelare completamente, agitare e centrifugare;

(6) Dopo aver centrifugato la miscela nella fase (5), rimuovere il surnatante, aggiungere solvente organico, miscelare completamente, agitare e centrifugare la miscela;

(7)  Ripetere la fase operativa (6) per 2-4 volte, rimuovere il supernatante dalla miscela centrifugata, liofilizzare con liofilizzatore, sigillarlo e conservarlo a 0-4 ℃ .

Questo brevetto realizza la separazione e la purificazione della proteina intracellulare efficace del batterio di desolforazione attraverso la centrifugazione del brodo di fermentazione, la frammentazione cellulare, l'estrazione e la purificazione delle proteine. È un metodo di estrazione facile da usare, a basso costo, sicuro e affidabile.

Riferimento

CN106478786A Un metodo per estrarre proteine ​​efficaci dai batteri di desolforazione.