CHAPS è un composto organico con formula molecolare C ₃₂ H ₅₈ N ₂ O ₇ S e peso molecolare 614,877. CHAPS è una sorta di detergente zwitterionico, ampiamente utilizzato nel processo di purificazione delle proteine. CHAPS può anche essere utilizzato nella ricerca biochimica per denaturare e dividere le cellule, estrarre RNA e DNA; Inoltre, CHAPS può essere utilizzato anche per la preparazione della soluzione tampone. Il brevetto CN102796726B descrive un metodo per estrarre l'acido nucleico da microrganismi misti. Questa settimana, l'editore di YACOO ha introdotto brevemente la composizione del reagente per il cracking di microrganismi misti e il metodo per estrarre l'acido nucleico dal cracking di microrganismi misti.  

Il reagente per il cracking di microrganismi misti è costituito dall'estratto A e dall'estratto B.

Metodo di preparazione dell'estratto A

Tris, EDTA, SDS, Tween 80, Triton X-100, Brij 58, CHAPS, sodio dodecil sarcosina β - Sulfidril etanolo e acqua sono stati miscelati per ottenere l'estratto A, in cui la concentrazione di CHAPS nell'estratto A era 0,05% - 0,2% (percentuale del volume);

Metodo di preparazione dell'estratto B

Il fenolo saturo d'acqua, l'etanolo e il pirrolidone sono stati miscelati per ottenere la soluzione di estrazione B. Il rapporto volumetrico di fenolo saturo d'acqua, etanolo e pirrolidone era 98:1:1.

L'estratto A, l'RNA vettore e il microrganismo misto vengono miscelati e quindi miscelati con l'estratto B per la reazione per ottenere la soluzione di reazione; Centrifugare e raccogliere la fase acquosa superiore per ottenere il lisato microbico misto.

Questo brevetto fornisce un metodo di estrazione di acido nucleico microbico misto, che può estrarre simultaneamente acido nucleico da campioni misti di virus, batteri gram-negativi, batteri gram-positivi, micoplasma e clamidia. Le sue caratteristiche principali sono il funzionamento semplice, il basso costo e il buon effetto di estrazione.

Riferimento

CN102796726B Estrazione di acido nucleico da microrganismi misti.