la malattia genetica si riferisce a una malattia causata da un cambiamento nel materiale genetico o controllata da un gene che causa la malattia. allo stato attuale, la diagnosi delle malattie genetiche adotta principalmente il metodo della citogenetica, in particolare l'analisi del cariotipo, che è di grande importanza nella diagnosi e nello screening delle malattie genetiche. la chiave del cariotipo è la cultura dei linfociti qualificati. il terreno di coltura tradizionale dei linfociti utilizza un sistema tampone di bicarbonato di sodio, che è facilmente influenzato dal biossido di carbonio nell'ambiente. man mano che il tempo di conservazione viene prolungato, il valore di ph viene aumentato, il che non favorisce la conservazione del mezzo. per superare i problemi tecnici di cui sopra, i ricercatori hanno usato Acido 4-idrossietilpiperazinoetanosolfonico (hepes) per sviluppare un mezzo ph più stabile.
il mezzo linfocitario è composto da 1640 terreno basale, fitoemagglutinina (pha, 100 mg / l), siero di vitello (20% in volume) e sistema di tampone doppio glicerofosfato / hepes (5 ~ 50 mm). il sistema di doppio tampone glicerofosfato / hepes è costituito da tampone fosfato (na2hpo4 e kh2po4), glicerofosfato di sodio ed epepe). i componenti e le concentrazioni specifiche sono riportati nella tabella 1 di seguito.
componente |
concentrazione |
mezzo di base |
1640 medio |
pha |
100mg / l |
glicerofosfato di sodio |
3g / l |
HEPES |
3g / l |
n / A 2 HPO 4 |
2g / l |
kh 2 Po 4 |
1g / l |
siero di vitello |
20% |
prendere i componenti del mezzo di cui sopra, aggiungere all'acqua ultrapura, in modo che i componenti siano completamente disciolti; aggiungere acqua ultrapura a volume, filtrare e sterilizzare.
il mezzo di coltura dei linfociti utilizza un sistema tampone di sodio glicerofosfato / hepes, non ha alcun effetto sulla successiva coltura delle cellule e può stabilizzare il pH delle cellule; il sistema tampone non è influenzato dall'anidride carbonica nell'ambiente e dalle restanti componenti del gas, ed è vantaggioso per la conservazione a lungo termine del mezzo.
[1] terreno di coltura linfocitario con ph stabile e metodo di preparazione e applicazione dello stesso. cn104988120b, 2018-12-18.
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