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Applicazione di soluzione di dissociazione dell'acido nucleico additivata con isotiocianato di guanidina|CAS593-84-0| nell'estrazione e purificazione degli acidi nucleici 2021-12-23 14:30:42

Durante lo scoppio del COVID-19 , la diagnosi rapida dell'acido nucleico è estremamente importante per la prevenzione e il controllo dell'epidemia. L'estrazione del campione di acido nucleico è divisa in due parti: dissociazione di proteine ​​e acidi nucleici ed estrazione di acido nucleico. L'attuale estrazione e purificazione dell'acido nucleico utilizza principalmente l'adsorbimento di resina o l'adsorbimento di sfere magnetiche, che richiede una centrifuga ad alta velocità o uno strumento automatico di estrazione dell'acido nucleico, che richiede molto tempo. Per risolvere i problemi esistenti, Li Xiaofeng e altri hanno sviluppato una soluzione di dissociazione dell'acido nucleico. La soluzione di dissociazione è composta da isotiocianato di guanidina , fenolo saturo d'acqua, agente riducente alcol e 8-idrossichinolina. I componenti e le loro concentrazioni e valori di pH sono i seguenti [1] :

Isotiocianato di guanidina : la concentrazione molare è 1mol/L-2mol/L;

Fenolo saturo d'acqua: la concentrazione percentuale in massa è del 25%-50%;

Agente riducente l'alcol: l'agente riducente l'alcol è 2-mercaptoetanolo o ditiotreitolo e la concentrazione percentuale in massa è 0,175%-0,35%;

8-Idrossichinolina: la concentrazione percentuale in massa è 0,05%-0,1%;

Il pH della soluzione di dissociazione è 7,0-8,5.

L'applicazione combinata della soluzione di dissociazione e della colonna di gel ha i seguenti effetti benefici:

(1) Le cellule vengono lisate rapidamente, l'estrazione dell'acido nucleico può essere completata in 1 minuto e l'acido nucleico estratto dalla dissociazione può essere utilizzato direttamente nella reazione PCR, che riduce notevolmente l'intero tempo di funzionamento della diagnosi dell'acido nucleico PCR;

(2) L'integrità dell'acido nucleico può essere mantenuta a lungo: dal campionamento del campione, al trasporto all'estrazione in laboratorio dell'acido nucleico, può mantenere l'integrità dell'acido nucleico in appena tre minuti e fino a una settimana;

(3) Non c'è bisogno di essere equipaggiati con apparecchiature costose, solo una centrifuga portatile.


Riferimenti

[1] NC 112159806 B Applicazione di una soluzione di dissociazione dell'acido nucleico nell'estrazione e purificazione dell'acido nucleico.

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