la soluzione tampone viene utilizzata negli esperimenti biochimici per stabilizzare il pH del sistema. stracci,3- (n-morfolino) acido propanosolfonico, mes, acido 2-morfolinoethanesulfonic, sono comunemente usati negli esperimenti biologici e hanno svolto un ruolo molto importante. qual è la differenza tra i due buffer? come preparare la soluzione tampone?
mop (cas 1132-61-2), Acido 3- (n-morfolino) propanosolfonico
il range di buffer di mops è 6,5 ~ 7,9. può essere usato:
(1) come tampone funzionante in elettroforesi e per purificazione di proteine in cromatografia;
(2) come tampone di lisi per le cellule di escherichia coli;
(3) come tampone per l'isolamento e la trasfezione del rna in Northern blot;
(4) in terreno agar per la coltura di batteri, lieviti e cellule di mammifero;
(5) come eluente nella cromatografia di filtrazione su gel;
(6) per il test dell'acido bicinconinico (bca);
(7) per lo studio sul trasporto degli elettroni e sulla fosforilazione della preparazione del campione di cloroplasti.
il metodo di preparazione per il tampone 10 × mop è il seguente:
(1) i mop 41.8g sono disciolti in circa 700 ml di acqua trattata depc;
(2) ph regolato a 7.0 con 2n naoh;
(3) alla soluzione sono stati aggiunti 20 ml di 1 m naoac e 0,5 m edta (ph 8.0) trattati con depc;
(4) portare il volume a 1l, quindi filtrare con una membrana filtrante da 0,45 μm per rimuovere le impurità, conservare a temperatura ambiente e proteggere dalla luce.
tampone mes, acido 2-morfolinetanosolfonico
il range del buffer è 5,5 ~ 6,7, il valore pka del buffer mes è vicino al ph fisiologico, è usato nei seguenti esperimenti:
(1) sostituire il cacodilato altamente tossico e il tampone ionico citrato e malato;
(2) supporti tamponati per cellule batteriche, di lievito e di mammiferi. alte concentrazioni di mes sono tossiche per la maggior parte delle piante, ma possono essere utilizzate in terreni vegetali a concentrazioni ~ 10 mm;
(3) studiare la proteina tau;
(4) elettroforesi e cromatografia comprendenti elettrocromatografia capillare, cromatografia su gel di filtrazione, cromatografia su colonna di fosfocellulosa, cromatografia di interazione idrofobica, cromatografia a scambio cationico e sds-page;
(5) complesso con molecole di organotina (iv) come agenti antitumorali.
il metodo di preparazione è il seguente:
supponiamo che il ph sia 6 e la concentrazione sia 100mm:
(1) 0,1 moli o 19,5 g di mes sono stati pesati e disciolti in 500 mi di acqua depc;
(2) il ph è stato regolato a 6.0 con 1n o 10n di soluzione di naoh;
(3) portare il volume a 1l, conservare a 4 ° c.
la scelta del buffer non è solo in base alla gamma di buffer richiesta e alla capacità della soluzione tampone, ma anche in base al contenuto sperimentale specifico. inoltre, lo sperimentatore dovrebbe prestare attenzione alla sterilizzazione di contenitori, acqua e altri additivi.
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