tris (idrossimetil) aminomethane(tris), noto anche come trometamina, è una base debole comunemente usata come sistema tampone biologico nella produzione di prodotti biologici. può causare ipoglicemia, ipotensione, nausea, vomito, assunzione eccessiva o insufficienza renale può causare alcalemia, inibire anche la respirazione e persino smettere di respirare. pertanto, è necessario testare il contenuto di tris nei prodotti biologici. allora come rilevarlo?

allo stato attuale, il rilevamento quantitativo di tris adotta principalmente il metodo di titolazione acido-base, ma il suo limite quantitativo è elevato ed è suscettibile all'interferenza di vari gruppi acidi base. i prodotti biologici contengono una grande quantità di gruppi carbossilici, gruppi amminici e anioni e cationi, quindi il tris nel prodotto non può essere rilevato quantitativamente mediante titolazione.

per risolvere i problemi di cui sopra, i ricercatori [1] hanno inventato un metodo per rilevaretris bufferin prodotti biologici mediante cromatografia ionica e le fasi specifiche sono le seguenti:

(1) l'acqua per l'iniezione viene aggiunta al prodotto biologico liofilizzato per dissolversi e filtrare, oppure la soluzione acquosa biologica viene filtrata direttamente e il filtrato viene preso come soluzione di prova; si aggiunge tris all'acqua da iniettare per dissolversi e si ottiene la soluzione di diverse concentrazioni come soluzione di riferimento dopo la diluizione del gradiente;

(2) un rilevatore amperometrico a impulsi e il metodo di reintegro post colonna. la colonna era una colonna di scambio cationico cs16 con una fase mobile di soluzione di acido metanosolfonico 40 mmol / l ad una portata di 1 ml / min. il reintegro dopo colonna era una soluzione alcalina di idrossido di sodio o idrossido di potassio a una concentrazione di 500 mmol / l con una portata di 0.3 ml / min;

(3) l'analisi quantitativa ha utilizzato il metodo standard esterno, sono state testate le varie concentrazioni preparate della soluzione di riferimento e è stata disegnata la curva standard dell'area di concentrazione del picco di tris per ottenere l'equazione di regressione della curva standard; la soluzione campione è stata testata nelle stesse condizioni e il contenuto di tris nel campione di prova è stato calcolato con l'equazione di regressione di cui sopra.

il limite di rilevamento è 3,14 × 10-5 mmol / l, il limite minimo di quantificazione è 1,05 × 10-4 mmol / l, il tasso di recupero è 93,8% ~ 100,1% e l'intervallo di riproducibilità è 0,10% ~ 0,52%. (rsd, n = 5).

confrontato con il tradizionale metodo di titolazione acido-base, il metodo ha un limite di rivelazione inferiore e un limite inferiore di quantificazione, e non è interferito dal gruppo acido base trasportato sulla proteina, e non è interferito con l'anione e il catione nel campione, e non richiede derivatizzazione e preparazione di campioni complessi. può rilevare il contenuto di tris (cas 77-86-1) in diversi prodotti biologici, ha una buona selettività e non ha altre interferenze di picco nella regione del tempo di ritenzione tris. ha un'elevata sensibilità di rilevamento e una rapida velocità di analisi e può essere applicato al rilevamento del contenuto e alla valutazione della qualità del tris nei prodotti biologici delle industrie correlate.

riferimento

[1] yu xiaoping, yu jin. un metodo per la determinazione di tris in prodotti biologici mediante cromatografia ionica. 2018, cn107782829a.