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i mop e gli hepes possono essere combinati come un buffer di gioco 2019-04-15 17:56:08

stracci,3- (n-morfolino) acido propanosolfonico, è un importante buffer biologico, il range del buffer è 6.5 ~ 7.9; l'hepes, acido 4- (2-idrossietil) -1-piperazineetansolfonico, è anche un tampone di ioni idrogeno che ha una buona capacità tampone nel range di pH di 6.8 ~ 8.2 e può controllare un ph costante per un lungo periodo. sono entrambi ampiamente usati negli esperimenti biologici e chimici. quando i due si combinano per fungere da buffer di gameti, quali sono i vantaggi?


l'importanza del buffer dei gameti

i gameti si riferiscono a cellule mature prodotte dal sistema riproduttivo quando l'organismo si riproduce sessualmente, indicato come cellule germinali. i gameti sono divisi in gameti maschili e gameti femminili. i gameti femminili di animali e piante sono di solito chiamati ovuli (ovuli o uova) e i gameti maschili sono chiamati spermatozoi. il tampone gamete è un tampone contenente antibiotici, ioni basici e varie sostanze energetiche. è usato per lavare le uova e lo sperma all'esterno dell'incubatore per prepararsi per la fecondazione in vitro (fecondazione in vitro). drastiche fluttuazioni nell'ambiente possono compromettere gravemente la vitalità dei gameti, che può avere un effetto devastante sulla qualità e la vitalità dell'embrione. il successo delle operazioni successive nella IVF dipende dal fatto che l'omeostasi dell'ovocita possa essere mantenuta. i tamponi gamete mantengono il metabolismo degli ovociti e riducono gli effetti dello stress sui gameti, preparandosi così alla fecondazione.


buffer di gameti tradizionale
attualmente le coppie tampone di biossido di carbonio, anidride carbonica e bicarbonato di sodio sono spesso utilizzate nei tradizionali tamponi per gameti. sebbene i mop e l'hepe siano ampiamente usati nel campo della riproduzione assistita, gli effetti della temperatura sui valori di pka di entrambi sono spesso ignorati, così come gli effetti dei mop sull'illuminazione. pertanto, il potenziale rischio di tampone sulla qualità dei gameti e degli embrioni ha spinto i ricercatori a rivedere il sistema tampone ph attualmente utilizzato per la fertilizzazione clinica in vitro.

pertanto, è stato sviluppato un sistema di buffer di ph-matching più stabile, nonché un buffer di gameti preparato utilizzando il sistema. il tampone gamete della presente invenzione riduce l'effetto del ph sull'attività dei gameti, ei gameti lavati dal tampone gamete hanno una velocità di formazione di blastocisti notevolmente migliorata e morfologia uniforme nel test dell'embrione tardivo.


nuovo buffer gamete

entrambi i mop e gli hepes sono zwitterioni a base di acidi aminosolfonici, che agiscono come anfoliti e forniscono un gradiente di ph relativamente stabile. gli inventori hanno scoperto che la combinazione di mop ed hepes può controllare il ph in un intervallo più ristretto e avere una capacità tampone più forte di una singola coppia di buffer alla stessa concentrazione. quindi, usando il sistema di tamponi mops ed hepes, l'effetto stress dei gameti può essere ridotto e preparato per la successiva ivf. allo stesso tempo, la stessa concentrazione di mop e sistema tampone dell'herpes riduce la citotossicità della coppia tampone rispetto alla singola coppia di tamponi ed è più favorevole alla vitalità dei gameti.


il piano specifico è il seguente:

il solvente è l'acqua, compresi i sistemi di tamponi per mop e hepes; contiene anche sodio, potassio, calcio, ioni magnesio, oltre a glucosio, sodio piruvato, albumina e amminoacidi non essenziali. nella soluzione preferita:


  • i componenti del tampone gamete sopra sono: 90.24 ~ 110.18mmol / l cloruro di sodio, 0.43 ~ 0.52mmol / l cloruro di magnesio, 4.267 ~ 5.013mmol / l cloruro di potassio, 0.1522 ~ 0.2567mmol / l solfato di magnesio, 0.13 ~ 0.30mmol / l- calcio pantotenato, 0.3513 ~ 0.3958 mmol / l fosfato di potassio, 21.0 ~ 21.6 mmol / l lattato di calcio, 8 ~ 12 mmol / l hepes, 8 ~ 12 mmol / l mops, 3.85 ~ 4.30 mmol / l bicarbonato di sodio, 0.3129 ~ 0.3501 mmol / l-sodio piruvato, 2,5 ~ 3 mmol / l glucosio, 0,95 ~ 1,06 mmol / l alanil glutamina, 0,09 ~ 0,10 mmol / l l-taurina, 5 ~ 10 ug / ml gentamicina solfato, 5 mg / ml di albumina umana sierica e Aminoacidi non essenziali da 0,5 ~ 1,5 mmoli / l umani (glicina, l-alanina, l-valina, l-serina, l-asparagina, l-aspartato, acido l-glutammico).
  • il ph del buffer gamete è 7.25 ~ 7.35.
  • la pressione osmotica del tampone gametofisico è di 285 ~ 295 mosm / kg.
  • il contenuto di endotossina del tampone gamete è & lt; 0,25 eu / ml.

confrontato con il liquido di tampone gamete convenzionale, il contenuto di endotossina del tampone è inferiore, il che riduce la tossicità per i gameti durante l'uso; la gamma ph è più stretta e più stabile, e i gameti possono mantenere meglio lo stato stazionario e ridurre l'attività vigorosa dei gameti quando utilizzati. la morfologia dell'embrione è anche sazietà, che favorisce la formazione e lo sviluppo degli embrioni, preparandosi così alla fecondazione in vitro.


modificato da suzhou yacoo science co., ltd.
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