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Metodo di NSP-DMAE-NHS etichettato acidi nucleici 2020-07-01 18:43:21

Acridina estere (NSP-DMAE-NHS), polvere di colore giallo, CAS No.: 194357-64-7 è un importante chemiluminescenza reagente con alto rendimento quantico,mite condizioni di reazione, buona riproducibilità, e ad alta efficienza chemiluminescenza NSP-DMAE-NHS è ampiamente usato nei campi di inorganici, composti organici, monitoraggi ambientali, biologiche e farmaceutiche, analisi, etc. Inoltre, è anche ampiamente utilizzato per il rilevamento sensibile e la diagnosi di molti tipi di malattie.

In termini di diagnostica in vitro, acridinium estere(NSP-DMAE-NHS) composti sono ben adatti per l'etichettatura di filamenti di DNA per rendere chemiluminescenza sonde di DNA. Questo articolo introduce un metodo di NSP-DMAE-NHS etichettato acidi nucleici.

Acido nucleico è più importante della sostanza in tutte le molecole biologiche, ampiamente esiste in tutti gli animali e cellule vegetali, microrganismi, di acido nucleico è diviso in due categorie: l'acido desossiribonucleico (DNA) e l'acido ribonucleico (RNA). La moderna ricerca medica risultati mostrano che la presenza di molte malattie, come il cancro e le malattie genetiche, è legata alla mutazione del DNA, e molte malattie infettive sono causate da un virus, agenti patogeni o parassiti nell'ambiente. Pertanto, l'analisi di virus specifica sequenza di DNA è favorevole per il controllo dell'epidemia situazione.

In ibridazione degli acidi nucleici analisi, la preparazione di personale altamente specifico e sensibile sonde marcate è la chiave per il successo di ibridazione degli acidi nucleici analisi. Acridina estere(NSP-DMAE-NHS) derivati possono essere etichettata su sonde di acido nucleico senza catalizzatore e la luminescenza rendimento quantico non è interessato. Inoltre, In determinate condizioni, l'etichetta acridinium estere(NSP-DMAE-NHS) sul unhybridized single-stranded DNA è idroliticamente distrutto, e solo il double-stranded NSP-DMAE-NHS formata dall'ibridazione in grado di produrre chemiluminescenza, e l'intero processo di ibridazione può essere monitorato senza isolamento.

Questo metodo di identificazione dell'acido nucleico con acridinium estere(NSP-DMAE-NHS) comprende i seguenti passaggi :

(1) la protezione del 5 ° terminale e il 3'il terminale di una sonda di DNA;

(2) etichettatura acridinium estere: l'attivazione di 25mm NHS acridinium estere sciogliere in DMSO, per la preparazione di 1 m di una soluzione tampone HEPES (PH=8.0), in base alla condizione che il rapporto molare di acido nucleico il NHS acridinium estere è di 1 a 5, l'esecuzione di aggiungere alla soluzione tampone HEPES, e l'esecuzione di una reazione a 37 ° C per 1h;

(3) l'esecuzione di purificazione HPLC. Il metodo ha effetti benefici che, secondo un metodo ordinario, uno acridinium estere possono essere etichettati a 5' terminale dell'acido nucleico.

Il metodo creativo etichette acridinium estere(NSP-DMAE-NHS) alle due estremità, e migliorare ulteriormente la sensibilità di rilevamento.

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Riferimento: Metodo di NSP-DMAE-NHS etichettato acido nucleico CN109852669A

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