in esperimenti biochimici, la soluzione tampone svolge un ruolo indispensabile, che può resistere all'impatto di una piccola quantità di acido forte e alcali, mantenere il valore pH più vicino all'ambiente fisiologico. hepes di agente tampone -un agente tampone chimico organico zwitterionico con un intervallo di buffer efficace di 6.8 ~ 8.2, che può essere utilizzato in una vasta gamma di reazioni biochimiche. è comunemente usato nella ricerca di organelli e proteine ​​ed enzimi ph sensibili al denaturato, così come kit diagnostico biochimico, kit di estrazione di DNA / DNA e kit diagnostico di pcr.

quindi, come preparare e utilizzare l'hepes ( Acido 4- (2-idrossietil) -1-piperazineetansolfonico )?

sulla preparazione della soluzione di buffer dell'herpes, ci sono diverse viste in documenti separati. a seconda dell'applicazione, uno è hepes + naoh e l'altro è hepes + sale. i metodi specifici sono riassunti come segue:

(1) 1m hepes + naoh, ph = 7,0 (500 ml)

119,15 g l'hepes viene sciolto in 400 ml di acqua distillata, quindi aggiungere 0,5 ~ 1 m di soluzione acquosa naoh per regolare il pH, quindi diluire a 500 ml con acqua distillata, conservare a 4 ° c.

(2) hepes + sale (500 ml)

hepes 6,5 g, nacl 8,0 g, na2hpo4 • 7h2o 0,198 g, regolare il valore pH con 0,5 m di soluzione acquosa naoh, diluire a 500 ml.

ci sono due modi per usare l'hepes ( cas: 7365-45-9 ):

(1) secondo la concentrazione richiesta, può essere aggiunto direttamente al terreno di coltura, quindi filtrare e sterilizzare: 2.38 g di hepes è stato aggiunto a ciascun terreno di coltura da 1000 ml, regolare il pH a 7.2 con 1n naoh, filtrare e sterilizzare. la concentrazione di hepes è 10mmol / l.

(2) preparare 100 ml di soluzione madre (1 mol / l), prendere 99 ml di terreno di coltura e 1 ml di soluzione madre, la concentrazione di applicazione finale è ancora 10 mmol / l.

hepes ( numero di modello: q0005 ) appartiene al buffer del bene e presenta i vantaggi di elevata solubilità in acqua, impermeabilità della membrana, resistenza chimica e resistenza all'enzimolisi e non si combina con ioni metallici. ma va notato che la concentrazione finale di hepes è 10 ~ 50mmol / l. in circostanze normali, 20mmol / l di hepes potrebbero ottenere l'effetto tampone, i ricercatori dovrebbero preparare la soluzione in base alla situazione reale con l'hepes commerciale.