negli esperimenti biochimici, la ricetta delbuffer è spesso la priorità principale dell'esperimento e una ricetta veramente affidabile può sicuramente cambiare il destino dell'esperimento.

stracci,3- (n-morfolino)acido propanosolfonico, è un buffer biologico, il range del buffer è 6,5 ~ 7,9, che è adatto per lo studio del trasferimento di elettroni e della fosforilazione nello strato sottile di cloroplasto; può essere preparato in una varietà di agar, che viene utilizzato come tampone non tossico nella coltura di streptomyces coelicolus e nella produzione di cefalosporine nel terreno di coltura limite. può essere utilizzato come componente del sistema elettrolitico nell'elettroforesi di isoelettrofocalizzazione (ief) dell'elettroforesi bidimensionale del gel. può anche essere utilizzato nell'ibridazione nordica come buffer per la separazione e il trasferimento di rna.

un buffer così importante, qual è la ricetta? questo articolo riepiloga la ricetta per quasi tutti i buffer di mops come riferimento.

(1)mop buffer(10 ×)

rEAGEnte	quantità (per 1 l)	concentrazione finale
acido opaco, ultrapuro	41,86 g (o 46,26 g di sale di sodio)	0,2 m
Acetato di sodio anidro	4,1 g (o 6,8 g di acetato • 3h2o)	0,05 m
n / A2edta (0,5 m, ph 7,5)	20 ml	0,01 m

porta il ph a 7.0 con naoh (o se viene usato il sale di sodio mop, quindi usa l'acido acetico glaciale per regolare il ph). non sterilizzare conservare al buio, coperto con un foglio, a temperatura ambiente. la soluzione diventerà gialla con il tempo, ma questo è normale.

(2) buffer mop (5x)

reagente	quantità (per 100 ml)	concentrazione finale (5x)
MgSo4	0,1204 g	10 mm
mop	10.463 g	0,5 m
NACl	14,61 g	2.5 m

sciogliere i reagenti elencati sopra in 50 ml di H2o. regolare il pH a 7,5 con naoh, quindi aggiungere h2o a 100 ml. filtrare per sterilizzare e conservare al buio.

(3) sali di mops

reagente	mop	Tricine	Fecosì4• 7h2O	nh4cl	K2SO4	CaCl2• 2h2O	MgCl2	NaCl
quantità	400 millimetri	40 millimetri	0,1 millimetri	95 millimetri	2,8 millimetri	5 micron	5,3 millimetri	0.5m

sciogliere in un volume finale di 1 litro e sterilizzare per filtrazione. aggiungere 10 μl di micronutrienti per litro prima dell'uso.

(4) tampone mops-egta

reagente	quantità (per 1 l)	concentrazione finale
mop	20,9 g	0,1 m
MgSO4	0,24 g	2 mm
EGTA	0,38 g	1mm
NaCl	29,2 g	0,5 m

sciogliere i reagenti di cui sopra in 800 ml di dietilene pirocarbonato (depc) trattato con acqua. aggiusta il ph a 7.5 con naoh e poi aggiungi h2o trattato depc per dare un volume finale di 1 l. sterilizzare il tampone usando un filtro da 0,22-μm. il tampone può essere conservato a temperatura ambiente per diversi mesi.

(5) tampone per elettroforesi su mop

Mop da 0,2 m (pH 7,0), sodio acetato 20 mm, 10 mm edta (pH 8,0).

per soluzione 10x: sciogliere 41,8 g di mop in 700 ml di sterile dietil pirocarbonato (depc) trattato con acqua. regola il ph a 7.0 con 2 n naoh. aggiungere 20 ml di dietil pirocarbonato (depc) trattata con 1 m di sodio acetato e 20 ml di dietil pirocarbonato (depc) trattata con 0,5 m di edta (pH 8,0). regolare il volume della soluzione a 1 litro con dietil pirocarbonato (depc) trattato h2o. sterilizzare la soluzione facendola passare attraverso un filtro millipore da 0,45 μm e conservarla a temperatura ambiente protetta dalla luce. il tampone ingiallisce con l'età se viene esposto alla luce o è autoclavato. il tampone color paglia funziona bene, ma il buffer più scuro no.

(6) buffer di fissazione pfa-mops-egta

reagent	quantità (per 50 ml)	concentrazione finale
paraformaldeide	2 g	4% (p / v)
NaOH	(1 n) 5 ml	/
HCl	(1 n) 5 ml	/
mop-EGTA buffer	to 50 mL	/

fare fresco. per dissolvere la paraformaldeide, aggiungere 2 g a 5 ml di 1 naoh. riscaldare a 60 ° c per dissolvere e aggiungere 5 ml di 1 n hcl e 35 ml di tampone mop-egta. regolare il pH a 7,5 se necessario e quindi aggiungere il tampone mop-egta per dare un volume finale di 50 ml. conservare il buffer a 4 ° c per diversi giorni.

spero che queste ricette possano aiutarti nel successo dei tuoi esperimenti.

modificato dasuzhou yacoo science co., ltd.

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