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ricette di tampone comunemente usato contenente guanidina cloridrato 2019-04-15 17:55:54

come sappiamo tutti,guanidina cloridratoè spesso usato come intermedio in medicinali, pesticidi, coloranti e altri composti organici, è anche un'importante materia prima per sulfonamidi e acido folico; può essere usato come forte denaturante nell'estrazione del totale rna dalle cellule. allo stesso tempo,guanidina cloridratoè spesso usato in vari buffer per esperimenti biologici. diamo un'occhiata alle seguenti ricette.


1.tampone di guanidina cloridrato (guhcl)
  • 6 m di guanidina cloridrato
  • Imidazolo 8 mm
  • 50 mm nah2po4
  • Tris da 50 mm

regola ph a 8.0. preparare entro pochi giorni dall'esperimento e conservare a temperatura ambiente (20 ~ 25 ° c).


2. tampone denaturato contenente guanidina cloridrato
  • 6 m di guanidina cloridrato
  • 5 mm dtt
  • 50 mm tris-cl (ph 7.5)

scaldare la soluzione a 40 ° C per sciogliere la guanidina hcl. regolare il ph a 7,5 se necessario.


3. Tampone di clivaggio di idrossilammina
concentrazioni finali: 2m di idrossilammina cloridrato, 4,3 m di guanidina cloridrato, 0,2 m di carbonato di potassio (pH 9,0)
  • idrossilammina cloridrato (grado analar)
  • guanidina cloridrato (6 m acquoso), prechilled
  • carbonato di potassio (1 m)
  • naoh (50% w / v)
sciogliere 3,5 g di idrossilammina cloridrato in 12 ml di cloridrato acquoso guanidina 6 m pre-riempito (utilizzare un bagno di ghiaccio). aggiungere 2 ml di 50% (peso / volume) lentamente con agitazione energica (barra di agitazione magnetica) seguita da 5 ml di 1 m di carbonato di potassio. regolare il ph a 9.0 con il 50% di Naoh, quindi regolare il volume a 25 ml con 6 m di guanidina cloridrato.

l'inclusione di guanidina cloridrato è segnalata per migliorare l'efficienza della scissione asincrona.


4. buffer di solubilizzazione
  • 8 m di guanidina cloridrato
  • 50 mm tris-cl (ph 7.5)
or
  • 10 mm dtt (ditiotreitolo)
  • 8 m di guanidina cloridrato
  • Tris-cl 50 mm (ph 8.5)


5. buffer denaturante per il test di ellman
  • guanidina cloridrato (6 m)
  • na2hpo4 (0,1 m, pH 8,0)


6. buffer di colonna sec
  • Fosfato di sodio 50 mm, contenente 150 mm nacl (pH 7,0)
  • tampone denaturato contenente urea
  • tampone denaturato contenente guanidina cloridrato
  • tamponi di eluizione peptidica


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