l'albumina sierica (sa) è una delle proteine ​​più abbondanti nella circolazione del sangue e ha importanti funzioni fisiologiche come la conservazione, il trasporto e la protezione degli organismi. L'albumina bovina del siero (bsa) è stata usata come modello proteico ideale per lo studio delle proprietà fisico-chimiche, della struttura e della funzione a causa del peso molecolare e della solubilità relativamente ridotta. L'acido 8-anilino-naftalen-1-solfonico (ans) e i suoi sali di ammonio sono intermedi di vari coloranti azoici e sono comunemente usati come sonde fluorescenti. in questo articolo introdurremo l'interazione tra ans e bsa e cambiamenti conformazionali di bsa nel metodo di fluorescenza con ans come sonda.

interazione di ans e bsa

come sonda idrofobica fluorescente, ans (o ans-nh4) è ampiamente usato per studiare i cambiamenti conformazionali della bsa. l'interazione tra i due è principalmente attrattiva elettrostatica [1], ans e bsa hanno un forte sito di legame, in cui l'interazione elettrostatica svolge un ruolo importante. la presenza di gruppi di acido solfonico ha giocato un ruolo enorme. le molecole dell'acido solfonico sono solubili in acqua, hanno una grande polarità della superficie e la flessibilità molecolare e possono agire con gruppi caricati di proteine ​​per attrazione elettrostatica. a causa della maggiore flessibilità molecolare, è più adatta per l'assemblaggio di area proteica idrofobica. e il gruppo acido solfonico migliora l'acqua solubile di ans, e il contatto con il bsa più facilmente. allo stesso tempo, l'aumento della polarità della superficie delle ans è meno probabile per penetrare nel biofilm lipidico, riducendo il rischio di entrare nel corpo biologico.

cambiamenti di bsa in soluzione

con ans come sonda fluorescente, è stata studiata la variazione della fluorescenza endogena del residuo triptofano idrofobico e del suo microambiente per rilevare il cambiamento conformazionale della bsa in soluzione.

soluzione guanidina cloridrato

soluzione urea

rispetto al guanidina cloridrato, la bsa è più stabile in urea [3]. i cambiamenti di bsa in urea e la concentrazione critica del cambiamento conformazionale sono stati descritti in base alla variazione dei parametri di fluorescenza. i risultati hanno mostrato che i cambiamenti conformazionali della bsa includevano anche la variazione del residuo triptofano e la regione di legame della sonda ans nel processo di denaturazione dell'urea con l'aumento della concentrazione di urea: la regione di legame della sonda è più sensibile all'urea e la bassa - il denaturante di concentrazione può causare i suoi cambiamenti conformazionali a diventare allentati ed esporre al solvente idrofilo. la regione residua di triptofano è resistente a basse concentrazioni di urea (0-1,0 mol / l), il processo di denaturazione subisce un processo triaxico con estensione di contrazione e la velocità di cambio conformazionale raggiunge un massimo a una concentrazione di 3,0 ~ 5,0mol • l-1 e concentrazione critica a 5,4mol · l-1, il residuo triptofano è stato completamente esposto al solvente ad una concentrazione di 7,8mol · l-1 e in uno stato depolarizzato irreversibile.

per comprendere l'interazione tra ans e bsa e studiare il cambiamento della conformazione proteica dal livello molecolare, stabilire la legge della conformazione proteica con il cambiamento dell'ambiente, potrebbe fornire informazioni e teorie più rilevanti per la ricerca di proteine ​​e il progresso delle attività biologiche genetica e medicina molecolare.

Riferimenti

[3] zhang jiaxing, jin ke, yin zongning. caratterizzano il processo di denaturazione dell'albumina di siero bovino in urea mediante parametri di fluorescenza. giornale farmaceutico huaxi, 2012,27, 371 ~ 375.