nell'esperimento biochimico la soluzione tampone svolge un ruolo indispensabile, può resistere all'effetto di una piccola quantità di acido e alcali forti e mantenere il valore pH più vicino all'ambiente fisiologico del sistema. HEPES buffer e tris tampone sono comunemente utilizzati in tamponi sperimentali biologici e molte persone hanno spesso dubbi: qual è la differenza tra i due? questo articolo sarà un riepilogo comparativo.

introduzione e applicazione

l'ispezione è un bio-tampone zwitterionico, appartenente al buono del buono, l'intervallo di buffer efficace è da 6,8 a 8,2 e può essere ampiamente usato come reagente di tampone in una varietà di reazioni biochimiche e in alcune cellule di coltura. la concentrazione finale della muta è di 10 ~ 50mmol / l, il mezzo di coltura generale contenente 20mmol / l può ottenere la capacità di tampone. in aggiunta, i buffers sono generalmente utilizzati in organelli e proteine ​​e enzimi con mutability e ph-sensitivity, così come kit diagnostici biochimici, kit di estrazione dna / rna e kit diagnostici pcr.

Tris buffer: Tris è debolmente alcalino, pka è 8,1 a 25 ° C, e l'intervallo di buffer efficace è 7,0 ~ 9,2, la frequenza comunemente usata negli esperimenti biochimici era 6,8, 7,4, 8,0, 8,8. è spesso usato come tampone nelle esperienze di elettroforesi e gel, o come solventi di acido nucleico e proteine, anche la formazione di fibre intermedie di nematodi. i suoi tamponi derivati ​​te, tae, tbe, etc. sono comunemente usati nella stabilità, nello stoccaggio e nell'estrazione del DNA.

caratteristiche dei due tamponi

elimina i tamponi, e anche i tamponi di tutti i buoni hanno le seguenti caratteristiche:

i valori pka sono compresi tra 6,0 e 8,0;

alta solubilità in acqua;
con impermeabilità a membrana, non è facile penetrare il biofilm;

l'impatto sulla reazione biochimica è limitato, può essere resistente all'azione chimica e all'idrolisi enzimatica e non produce complessi o precipitazioni con ioni metallici;

la concentrazione di ioni, la composizione della soluzione e la temperatura hanno poco effetto sulla dissociazione;

La soluzione tampone tris ha le seguenti caratteristiche:

colpiti dall'ambiente, in generale, quando la temperatura aumenta di 1 ° c, il pH è diminuito di 0,03; facile da assorbire co2.

metodo di preparazione del tampone

la preparazione della soluzione di tampone hepes, a seconda dell'applicazione, uno è puro hepes + naoh e l'altro ispes + sale:

secca 6,5 ​​g, 8,0 g, na2hpo4,7 h2o 0,198 g, ha regolato il pH con 0,5 mg di soluzione acquosa di naoh e fanno 500 ml.

ci sono due metodi per la preparazione del tampone tris-hcl:

nel caso di 1l di 0,1 moli / l di tensio-hcl buffer: 12,11 g di base di tris è stato sciolto in 950 ~ 970 ml di acqua deionizzata e 4n hcl è stato aggiunto a goccia con agitazione per determinare il pH della soluzione e quindi aggiungere acqua per fare it 1l.

in sintesi, gli hepes e il tris buffer hanno differenze nel range di buffering, nelle aree di applicazione, nonché nelle caratteristiche e nei metodi di preparazione. nell'esperimento specifico, le condizioni sperimentali dovrebbero essere analizzate con attenzione. Inoltre, si dovrebbe notare che nella cromatografia di scambio ionico, se è stata utilizzata la colonna di scambio di cationi, si dovrebbe evitare il tampone di tris a causa della carica positiva, mentre l'elezione appartiene a tampone zwitterionico, la cromatografia di cautela e di anionizzazione è applicabile.