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caps - uno dei buffer del bene usato comunemente 2018-07-02 11:25:13



la soluzione tampone è solitamente una soluzione composta da "acido debole e sua base coniugata" o "base debole e suo acido coniugato", che può rallentare il cambiamento del pH quando viene aggiunta una certa quantità di altre sostanze. I buffer di good sono buffer zwitterionici, che sono generalmente composti organici a base di acido solfammico, i loro valori di ph sono relativamente stabili e non reagiscono con vari enzimi e reagenti chimici. è usato principalmente nel campo della biologia e della medicina. tappi (acido n-cicloesil-3-amminopropansolfonico) È uno dei buffer del bene usato comunemente, lo presenteremo principalmente sotto.


comunione dei respingenti del bene (compresi i tappi)


(1) alta solubilità in acqua;
(2) il pka è stabile (generalmente 6 ~ 8) e la capacità di rilasciare i protoni è stabile ed è meno influenzata dalla concentrazione di ioni, dalla composizione della soluzione e dalla temperatura;
(3) permeabilità della membrana cellulare bassa e non penetra facilmente nei biofilm;
(4) può chelare con ioni metallici in massa molare bassa ma non produce sedimenti con ioni metallici;
(5) elevata stabilità chimica;
(6) basso assorbimento della luce nella gamma di lunghezze d'onda dell'ultravioletto e del visibile;
(7) è meno probabile che la salatura si verifichi con macromolecole organiche negli organismi;
(8) i sali di elevata purezza sono facilmente disponibili;

(9) non partecipa a reazioni biochimiche e non interferisce con le reazioni biochimiche.


applicazione di tappi



tappi (cas 1135-40-6) ha un valore di pka di 10.4 a 25 ° c e un intervallo di buffer ph di 9.7 ~ 11.1. può essere utilizzato nei seguenti esperimenti:


(1) buffer di trasferimento western blot o buffer transmembrana, è più adatto per il trasferimento di proteine ​​di piccolo peso molecolare alla membrana pvdf o alla membrana di nitrocellulosa;
(2) tampone legante ed eluente in cromatografia a scambio cationico;
(3) tampone di corsa in elettroforesi capillare;
(4) soluzione di cristallizzazione efficace per varie proteine;
(5) tampone di saggio enzimatico;
(6) può supportare l'attività della fosfatasi alcalina e inibire la crescita di aeromonas a pH 10,5;

(7) adatto per la determinazione dell'acido bicinconinico (bca).


metodo di preparazione per caps buffer


si prega di consultare la seguente tabella (entrambe le concentrazioni di tampone e idrossido di sodio sono 0,1 mol / l):

ph di caps buffer
volume (tappi)
volume (idrossido di sodio)
6.8 250 0
10.0 218,3 31,7
10.5 178,6 71,4
10.8 156,3 93,7
11.2 138,9 111.1

l'operazione specifica della preparazione è: 0,1 mol / l soluzione tampone viene prima preparata in un matraccio tarato. durante il processo di configurazione, il tampone deve essere disidratato ad alta temperatura e raffreddato in un essiccatore; Allo stesso tempo viene formulata anche una soluzione di idrossido di sodio 0,1 mol / l. secondo la formula nella tabella sopra, può essere preparata una soluzione tampone corrispondente a pH, e l'idrossido di sodio è principalmente usato per regolare il ph.


va sottolineato che la maggior parte degli esperimenti con le proteine ​​deve essere eseguita a 4 ° C per prevenire il degrado delle proteine. il tampone configurato deve essere sigillato e stoccato, utilizzato il più presto possibile dopo l'apertura e durante l'esperimento devono essere indossate maschere monouso e camici da laboratorio per garantire la sicurezza e la salute degli sperimentatori.



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