il legame di disolfuro (-s-s-bond) è una sorta di legame covalente tra atomi di s. svolge un ruolo importante nella formazione di una struttura tridimensionale di molecole proteiche. al fine di identificare la struttura primaria di proteine, il legame disolfuro deve essere aperto in primo luogo. d TT e TCEP-HCl sono comunemente utilizzati per il riduzione del legame disolfuro , allora qual è la differenza tra loro?

4-ditiotreitolo (digitale terrestre)

dtt è un composto in cui i gruppi idrossilici di c-1 e c-4 di threitol sono sostituiti da gruppi di solfidril. è spesso usato nella riduzione del legame di disolfuro nelle proteine ​​e può impedire la formazione di legami cisina intramolecolare o intermolecolare di disolfuro.

dtt ha due gruppi di solfidrilici, la sua funzione può durare per 3 ~ 7 giorni e la volatilità non è forte. tuttavia, i legami disolfuro incorporati nella struttura proteica (l'inaccessibilità del solvente) spesso non sono in grado di essere ridotti dtt. al contrario, secondo il tasso di riduzione, può essere giudicato il grado di incorporazione del legame disolfuro. Inoltre, ni può essere ridotto dtt. così nella purificazione di proteine ​​contrassegnate con \"la sua\" usando la colonna ni, l'uso di dtt dovrebbe essere evitato.

tris (2-carbossietil) fosfina cloridrato ( TCEP-HCl )

il tcep-hcl è il migliore nella derivati ​​del fosforo trivalente . è una sostanza riduttiva incolore e insapore facilmente solubile in acqua. ha elevata stabilità nell'aria e nella soluzione acquosa, e ha leggermente colpito la temperatura e la concentrazione. tcep è un riduttivo parziale che ha poca reazione laterale con altri aminoacidi tranne cisteina e può essere utilizzato in condizioni acide (anche ph = 3). tcep ha i vantaggi di alta solubilità, bassa tossicità, buona stabilità in soluzione acida e alcalina. ha una capacità di riduzione più forte di dtt, e la sua funzione può durare per 2 ~ 3 settimane. il tcep è riconosciuto come una buona alternativa a dtt.

dtt e tcep-hcl possono essere sostituiti l'uno per l'altro, ma con diversi effetti. rispetto a dtt, tcep ha una capacità di riduzione più forte ed è più selettiva; tcep è più stabile sia in condizioni acide che alcaline; non ha alcun costo e non ha alcun impatto sul follow-up sperimentazione. quindi è spesso preferito nella ricerca della chimica proteica e della proteomica.