glucanole fosfatasi sono essenziali per la normale degradazione dell'amido nelle piante e nel glicogenometabolismo nei mammiferi. Arabidopsisfosfatasi fosfoglucaniche di talial'eccesso di amido 4 (sex4) è uno dei principi fondamentali di una tipica duplice specificitàfosfatasi (dps).

carrillo et al.(doi: 10.1016 / j.ab.2016.11.005) riportano due metodi sui test in gel per il glucanorilevamento della fosfatasi. e sex4 è stato selezionato come modello quale e .coli alcalinofosfatasi (ap) è stata usata come controllo. un metodo per il rilevamento dell'attività utilizzatapnpp e il secondo si applica BCIP / NBT. in primo luogo, i gel preparati eranosia macchiato con blu coomassie o sviluppato per l'attività fosfatasica utilizzandopnpp o copule bcip / nbt. due fosfatasi hanno mostrato un singolo, chiaro,banda cromogenica facilmente visibile che è coincidente con il blu coomassiecolorazione.

la sensibilitàdei due metodi è stato confrontato aumentando la quantità di enzimi caricati ini gel nativi. per entrambi i metodi, hanno scoperto che l'intensità della banda è direttamenteproporzionale alla mu dell'enzima sex4 caricato in ogni corsia. il sperimentalei risultati hanno mostrato che il dosaggio pnpp fosfatasi è possibile rilevare fino a 0,34mu di sex4 attività sui gel. e il dosaggio di fosfatasi bcip / nbt è possibilerilevare fino a 0,86 mu di attività sex4.

il lavoro dicarrillo et al. ha dimostrato che pnpp e bcip / nbt sono substrati molto buoniper la visualizzazione degli enzimi dell'attività glucan fosfatasi dopo gel di pagine nativepoiché l'enzima sex4 è stato facilmente rilevato. e il confronto tra pnpp ebcip / nbt ha dimostrato che pnpp sarebbe un substrato migliore per il rilevamento del glucanofosfatasi. e ipotizzano che due saggi riportati qui potrebbero essereestrapolato per testare altre glucan fosfatasi.

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